本发明涉及药物合成技术领域，尤其是涉及一种鼠胆酸的制备方法。所述鼠胆酸的制备方法，以3α，6α?二羟基?5β?胆烷酸为原料经烷基酯化，6位、3位选择性氧化，溴化反应，取代反应，6位还原，水解得到鼠胆酸。本发明通过上述合成路线制备得到鼠胆酸，即3α，6β，7β?三羟基?5α?胆烷酸，原料来源广泛，供应充足；并且，经过上述步骤得到的鼠胆酸的产率高，可达24.5％，适合大量制备，可为后续的相关研究提供数据支持及参考。