本发明属于免疫学的技术领域，公开了一种双模式ELISA酶免显色剂及其制备与应用。所述显色剂包括具有酶催化响应的聚集诱导发光材料；该聚集诱导发光材料为式I、II、III中一种以上。所述显色剂还包括双氧水和PBS溶液。本发明的显色剂在ELISA酶免诊断试剂盒中的应用。本发明的酶免显色剂具有更快的酶响应速度和灵敏度、更好的光稳定性；利用双氧水和PBS溶液以及上述聚集诱导发光材料，在与酶反应后，通过加入水或硫酸终止反应，一次测试中产生双重模式信号(吸收信号和荧光信号)，实现免疫检测灵敏度与线性检测区间的双提升，如前列腺特异抗原的检测灵敏度达到1.6pg/mL，线性检测区间覆盖7个数量级。