本发明公开了一种水解胶原蛋白口服液中多肽分子量的快速测定方法，包括以下步骤：（１）制备检测样品：取市售水解胶原蛋白口服液１０ｍｌ，水解胶原蛋白的质量浓度为１０５ｇ／Ｌ，加入２００μＬ去离子水搅拌均匀，再加入５ｍｌ的０．１ｍｏｌ／Ｌ的Ｔｒｉｓ?ＨＣＬ缓冲液，２ｍｌ的２，５?二羟基苯甲酸搅拌离心处理后用滤膜进行第一次粗滤，得到滤液；（２）将所得滤液通过特制的凝胶层析柱，经与分子量已知的标准品在相同条件下通过凝胶层析柱来计算待测样品的分子量，计算公式为：Ｖｅ＝ｋ１?ｋ２ｌｏｇＭｒ，其中，Ｖｅ为洗脱体积，ｋ１和ｋ２为常系数，Ｍｒ为分子量。